Fenilgalactosid CAS: 2818-58-8

Efecte sobre l'activitat de l'enzim: el fenilgalactoside s'utilitza habitualment per mesurar l'activitat de l'enzim β-galactosidasa.Quan el fenilgalactosid és hidrolitzat per la β-galactosidasa, allibera p-nitrofenol.L'acumulació de p-nitrofenol es pot mesurar quantitativament, proporcionant informació sobre l'activitat de la β-galactosidasa.Aquest efecte s'aprofita en aplicacions com ara assajos enzimàtics i sistemes de cribratge.

Anàlisi de l'expressió gènica: el fenilgalactosid s'utilitza sovint com a substrat en experiments de biologia molecular per estudiar l'expressió gènica.El gen lacZ, que codifica la β-galactosidasa, es fusiona habitualment amb seqüències reguladores d'altres gens d'interès.L'expressió del gen lacZ i la hidròlisi del fenilgalactoside per β-galactosidasa poden indicar el patró d'expressió i el nivell del gen objectiu que s'està estudiant.

Sistemes de cribratge: el fenilgalactosid és un component important dels sistemes de cribratge que fan ús de l'activitat de la β-galactosidasa.Un exemple àmpliament conegut és el mètode de cribratge blau-blanc, que s'utilitza per identificar cèl·lules recombinants o transformades en experiments de biologia molecular.Les colònies que han absorbit amb èxit l'ADN recombinant o han patit una recombinació genètica expressaran β-galactosidasa, donant lloc a la hidròlisi del fenilgalactosid i a la formació d'un color blau.

Purificació de proteïnes: en alguns casos, el fenilgalactosid es pot utilitzar com a lligand per a la cromatografia d'afinitat per purificar proteïnes que s'uneixen específicament a la β-galactosidasa o que són activades per ella.La proteïna d'interès pot tenir una etiqueta d'afinitat o una etiqueta de fusió que conté un domini d'unió a la β-galactosidasa.En passar la mescla de proteïnes a través d'una columna amb fenilgalactòsid immobilitzat, la proteïna desitjada es pot retenir selectivament i, posteriorment, eluir.