Fenilgalactòsid CAS: 2818-58-8

Efecte sobre l'activitat enzimàtica: El fenilgalactòsid s'utilitza habitualment per mesurar l'activitat de l'enzim β-galactosidasa. Quan el fenilgalactòsid és hidrolitzat per la β-galactosidasa, allibera p-nitrofenol. L'acumulació de p-nitrofenol es pot mesurar quantitativament, cosa que proporciona informació sobre l'activitat de la β-galactosidasa. Aquest efecte s'aprofita en aplicacions com ara assaigs enzimàtics i sistemes de cribratge.

Anàlisi de l'expressió gènica: el fenilgalactòsid s'utilitza sovint com a substrat en experiments de biologia molecular per estudiar l'expressió gènica. El gen lacZ, que codifica la β-galactosidasa, es fusiona habitualment amb seqüències reguladores d'altres gens d'interès. L'expressió del gen lacZ i la hidròlisi del fenilgalactòsid per la β-galactosidasa poden indicar el patró d'expressió i el nivell del gen diana que s'està estudiant.

Sistemes de cribratge: El fenilgalactòsid és un component important dels sistemes de cribratge que utilitzen l'activitat β-galactosidasa. Un exemple àmpliament conegut és el mètode de cribratge blau-blanc, que s'utilitza per identificar cèl·lules recombinants o transformades en experiments de biologia molecular. Les colònies que han absorbit amb èxit l'ADN recombinant o han experimentat recombinació genètica expressaran β-galactosidasa, cosa que provocarà la hidròlisi del fenilgalactòsid i la formació d'un color blau.

Purificació de proteïnes: En alguns casos, el fenilgalactòsid es pot utilitzar com a lligand per a la cromatografia d'afinitat per purificar proteïnes que s'uneixen específicament a la β-galactosidasa o són activades per aquesta. La proteïna d'interès pot tenir una etiqueta d'afinitat o una etiqueta de fusió que conté un domini d'unió a la β-galactosidasa. En passar la barreja de proteïnes a través d'una columna amb fenilgalactòsid immobilitzat, la proteïna desitjada es pot retenir selectivament i posteriorment eluir.